cr扩增：以含目的基因dna为模板，设计引物，在taq酶作用下，经变性、复性、延伸循环，大量扩增目的基因。
- 人工合成：已知目的基因序列，用dna合成仪直接合成。
2 构建基因表达载体
- 用相同限制酶切割目的基因和载体，如质粒，使其产生相同黏性末端。
- 用dna连接酶将目的基因与载体连接，形成重组dna分子。
3 导入受体细胞
- 植物细胞：常用农杆菌转化法，利用农杆菌ti质粒将目的基因整合到植物染色体。
- 动物细胞：常用显微注射法，借助显微操作仪将重组dna注入受精卵。
- 微生物细胞：用ca2处理细胞成感受态，使其吸收重组dna。
4 目的基因的检测与鉴定
- 分子水平检测：dna分子杂交看目的基因是否插入；核酸分子杂交检测转录；抗原 - 抗体杂交检测翻译。
- 个体生物学水平鉴定：对转基因生物做抗虫、抗病接种实验，观察性状。污染物。